2023 Autor: Jake Johnson | [email protected]. Zadnja izmjena: 2023-05-24 23:12
Kolesterol je steroid izveden iz ciklopentanoperhidrofenantrena, ili sterana sa sekundarnom hidroksilnom grupom na C3 ugljiku prvog ciklusa, između ostalih supstitucija. Sintetiše se u ljudskom tijelu u različitim tkivima, uglavnom u jetri i u zidu crijeva.
Približno tri četvrtine holesterola u krvi se sintetiše u telu, a preostala četvrtina se dobija hranom. Holesterol je osnova za sintezu različitih steroidnih hormona, kao što su testosteron, estradiol, itd.
Određivanje holesterola u krvi koristi se za dijagnostiku i praćenje dislipidemije, posebno kada je u pitanju hiperholesterolemija. Visok nivo ukupnog holesterola u krvi, zajedno sa niskim nivoom frakcije HDL holesterola, veoma je važan faktor rizika za bolesti kao što su ateroskleroza, arterijska hipertenzija, infarkt miokarda i druga kardiovaskularna oboljenja. Osim toga, smanjeni nivo ukupnog holesterola u krvi može biti povezan sa akutnim ili hroničnim zatajenjem jetre.
Određivanje holesterola u krvi prvi je opisao Liebermann 1885. i Burchard 1889. Prema Liebermann-Burchardovom principu, holesterol formira plavo-zeleno jedinjenje od nezasićenih polimernih ugljenih hidrata u medijumu u kojem se nalaze prisutna sirćetna kiselina,anhidrid sirćetne kiseline i koncentrovana sumporna kiselina. Kasnije je razvijena metoda Abell Kendall, specifičnija za holesterol, ali tehnički složena i uz upotrebu korozivnih agenasa.
Godine 1974. Roeschlau i Allain su osmislili potpuno enzimsku metodu za mjerenje holesterola u krvi. Ova metoda je danas najčešće korištena, a kasnije je opisana.
Uzorci krvi za doziranje moraju se uzimati natašte, venskom ili arterijskom punkcijom. Uzorak se mora centrifugirati da se dobije serum ili plazma odvojena od krvnih zrnaca.
Kolesterol kruži u krvi mnogo puta esterifikovan, odnosno vezan za masnu kiselinu na svom C3 ugljiku, umjesto za OH grupu. U enzimatskoj metodi određivanja holesterola, estri holesterola prisutni u krvi dolaze u kontakt sa komponentama reagensa koji su osmislili Roeschlau i Allain i dolazi do dole opisane reakcije.
Estri holesterola, u prisustvu vode, podležu delovanju enzima holesterol esteraze, prisutnog u reagensu, formirajući slobodni holesterol i slobodne masne kiseline.
Slobodni holesterol, pod dejstvom enzima holesterol oksidaze (koje obezbeđuje reagens), u prisustvu kiseonika, transformiše se u holesterol, oslobađajući vodikov peroksid.
Ovaj vodikov peroksid, zahvaljujući djelovanju enzima peroksidaze, reagira sa 4
aminofenazon i fenol koji se nalaze u reagensu, formirajući obojeni kinoncrvena, čiji se intenzitet boje može izmjeriti fotometrijom. Intenzitet formirane boje je direktno proporcionalan nivou holesterola prisutnog u krvi.
